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    認(rèn)識(shí)黑膠蟲(chóng)的真面目(上)

    發(fā)布時(shí)間: 2022-01-04  點(diǎn)擊次數(shù): 3136次

    江湖上流傳很久的黑膠蟲(chóng),到底真實(shí)身份是啥?

    今天讓我們一起來(lái)扒一扒~


    我們收集了全國(guó)29個(gè)黑膠蟲(chóng)污染樣本進(jìn)行DNA提取、測(cè)序、數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì),得到了鑒定結(jié)果,一起和大家分享一下吧。



    表:黑膠蟲(chóng)檢定

    微生物種屬樣本數(shù)
    G+/G-形狀
    直徑大小
    Mycoplasma  hyorhinis
    (豬鼻支原體)
    3//0.15~0.3 μm
    Mycoplasma bovis
    (牛支原體)
    1//0.15~0.3 μm
    Mycoplasma pulmonis
    (鼠肺支原體株)
    1
    //0.15~0.3 μm
    Mycoplasma yeatsii
    (山羊支原體)
    6
    //0.15~0.3 μm
    Actinobacterium sp.
    (放線菌屬)
    1G+絲狀寬度近于桿狀細(xì)菌,直徑0.5~1 μm
    Ralstonia sp.
    (羅爾斯通菌屬)
    1G-桿狀1.2×2.5~3.5 μm
    Brevundimonas sp.
    (短波單胞菌屬)
    1G-桿狀0.4~0.5×1-2 μm
    Blastomonas natatoria
    (泳池芽殖單胞菌)
    1G-卵圓形或桿狀/
    Pseudomonas sp.
    (假單胞菌)
    1
    G-桿狀(0.5~1)×(1.5~4) μm
    Sphingobium sp.
    (鞘脂菌屬)
    1G-桿狀/
    Sphingomonas sp.
    (鞘氨醇單胞菌)
    5
    G-桿狀0.3~0.8×1.0~2.7 μm
    Methylobacillus sp.
    (甲基菌屬)
    1G-桿狀0.8~1.0×1.0~8.0 μm
    Microbacterium sp.
    (微桿菌屬)
    2G+桿狀1~10×0.2~0.6 μm
    Herbaspirillumhuttiense
    (赫氏草螺菌)
    4G-螺旋型長(zhǎng)度至數(shù)十微米;螺旋波長(zhǎng)為5~15 μm,螺旋幅度約一乃至數(shù)微米


    如上表格所示:在這29個(gè)樣本中,有11個(gè)樣本鑒定為支原體,種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個(gè)樣本鑒定為細(xì)菌,種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草羅菌。



    支原體污染 


    本次實(shí)驗(yàn)中,有11個(gè)樣本鑒定為支原體污染。首先,我們先來(lái)了解一下支原體的基本特征。

    逍鵬生物實(shí)驗(yàn)室在做沉降菌檢測(cè)的時(shí)候,竟然出乎意外地培養(yǎng)出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣":圓形,核心部分較厚,向下長(zhǎng)入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。

    圖片

    圖1. 支原體菌落

    圖片

    圖2. 電鏡下的支原體

    圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


    在電子顯微鏡下,支原體大小為0.15~0.3 μm,無(wú)細(xì)胞壁,不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性,呈球形、球桿形、長(zhǎng)絲狀及分支狀等。


    豬鼻支原體  


    圖片

    圖3. 固體培養(yǎng)基上的豬鼻支原體集落

    圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


    鑒定結(jié)果:樣本1,6,15 為 Mycoplasma hyorhinis(豬鼻支原體)

    大?。?.15~0.3 μm

    感染宿主:其感染豬的上呼吸系統(tǒng)的上皮細(xì)胞,通過(guò)口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴(無(wú)癥狀攜帶者)感染

    污染細(xì)胞途徑:推測(cè)胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取,純化獲得的結(jié)晶,再制成的凍干制劑,過(guò)濾除菌不當(dāng)?shù)囊让溉芤嚎赡軘y帶豬鼻支原體,建議大家買(mǎi)品牌胰酶,降低污染風(fēng)險(xiǎn)


    鼠肺支原體  


    圖片

    圖4. 固體培養(yǎng)基上的鼠肺支原體株

    圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


    鑒定結(jié)果:樣本12 為 Mycoplasma pulmonis(鼠肺支原體)

    大?。?.15~0.3 μm

    感染宿主:大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜,附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方,可能是由表面糖蛋白介導(dǎo)的

    污染細(xì)胞途徑:在提取鼠源的細(xì)胞,例如鼠巨噬細(xì)胞,鼠肺動(dòng)脈上皮細(xì)胞,鼠原代海馬神經(jīng)元時(shí),如果提取的鼠帶有鼠肺支原體,就有可能會(huì)引入污染


    牛支原體  


    圖片

    圖5. 固體培養(yǎng)基上的牛支原體株

    圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


    鑒定結(jié)果:樣本28 為 Mycoplasma bovis(牛支原體)

    大小:0.15~0.3 μm

    感染宿主:主要寄生于牛體內(nèi),感染部位廣泛,感染牛的呼吸道,會(huì)引起肺炎、中耳炎、關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎

    污染細(xì)胞途徑:推測(cè)細(xì)胞增殖的主要營(yíng)養(yǎng)之一就是胎牛血清。胎牛血清來(lái)源于動(dòng)物,其主要通過(guò)0.1μm濾膜過(guò)濾除菌。如果血源及過(guò)濾除菌不當(dāng),就會(huì)給細(xì)胞帶來(lái)潛在的支原體污染,因此建議大家購(gòu)買(mǎi)品牌的胎牛血清

    山羊支原體  //


    圖片

    圖6. 固體培養(yǎng)基上的山羊支原體株

    圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


    鑒定結(jié)果:樣本9,10,17,18,19,20 為Mycoplasma yeatsii(山羊支原體)

    大小:0.15~0.3 μm

    感染宿主:主要寄生于山羊體內(nèi),感染部位廣泛,寄生于羊的外耳道,咽后淋巴結(jié)、肺、脾

    污染細(xì)胞途徑:此類污染來(lái)源異常詭異,因?yàn)榇蠹移綍r(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)源或營(yíng)養(yǎng)體系,很難接觸到此類污染的環(huán)節(jié),故很難推測(cè)到污染源頭。若培養(yǎng)相關(guān)的細(xì)胞或者使用相關(guān)的營(yíng)養(yǎng)體系,就比較容易推測(cè)污染來(lái)源了


    //  小結(jié)  //

    如果黑膠蟲(chóng)的真實(shí)身份是支原體,那么支原體本身不會(huì)游動(dòng),不符合黑膠蟲(chóng)污染活躍游動(dòng)或原地打轉(zhuǎn)、顫動(dòng)的特征,故推測(cè)可能細(xì)胞本身存在潛在的支原體污染,剛好被檢測(cè)出來(lái)了。


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